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GAPDH Ct값 맞춰야할까요?
레벨2 ㄱㄴ (대학원생)
안녕하세요! 실험을 하던 중 궁금한 것이 생겨 질문 올립니다. 제가 해야할 실험이 cell 1은 농도를 고정하고, cell 2는 농도별로 dilution한 후에 두 cell을 섞어 cell 2의 검출한계를 보는 것입니다. 우선 저는 RNeasy mini kit를 이용해 RNA를 뽑아 cDNA를 합성했습니다. GAPDH로 Ct값을 확인했는데 Ct값이 다 다르게 나오더라구요.. 이런 실험이라면, GAPDH의 Ct값이 다 다르더라도 (많게는 3~4정도 차이가 나도) Ct값을 맞추지 않고 실험을 하는게 맞을까요? 맞추지 않고 하는게 맞는 것 같아서 실험을 했는데, GAPDH가 너무 들쑥날쑥이라.. 맞는가 싶어서요.. 아니면 어느정도 맞추고나서 실험을 해야 할까요? 맞추고 실험을 하니 1/100 희석 한 샘플보다 1/10000 희석한 샘플이 detect가 더 많이 되네요 ㅠㅠ 장비 데모중인데다가 샘플 양이 너무 적어서 딱 한번만 실험을 할 수 있는 상황이라 여쭤봅니다 ㅠㅠ 감사합니다!
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