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질문 Ultracentrifuge로 pellet화 시켜서 물질을 얻어내려고 합니다.
알영양제꼭꼭(대학원생)  | 2021.06.08 17:08

식물에서 물질을 추출하기 위해 실험중에 있습니다

Ultracentrifuge를 이용해 물질을 down 시켜 마지막에 PBS에 resuspension을 한 후에 E-tube로 옮겨 담으려고 하는데

Ultracentrifuge를 하고나면 tube 바닥에 딱 붙어서 pellet이 잘 풀리지 않습니다.

pipetting 으로 하면 한 tube당 30분은 잡아 먹는거 같습니다. 계속 해봐도 잘 안되서 tip 끝으로 긁게 되고  그러면 둥둥 떠다녀서 잘풀리지도 않고 덩어리가 tip끝을 막아 bubble이 너무 많이 생겨 곤란합니다. 혹시 다른 좋은 방법이나 아니면 꿀팁같은게 있을까요? 그리고 원래 이렇게 오래 걸리나요?

#Ultracentrifuge
 
#pellet
 
#resuspension
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
abc  |  2021.06.08    

강하게 voltexing 해주면 금방 풀리는데... voltexing 기계가 없나요?ㅠㅠ

대왕개구리SPEED  |  2021.06.08   
초원심분리 후에는 쉽게 안풀립니다.
초원심분리가 추출방법인가요?
알영양제꼭꼭  |  2021.06.08   

ultracentrifuge tube가 오픈 tube인데 그냥 위에 막고 vortexing하면 되나요??

꽃개구리느림보  |  2021.06.08   

Inert 비드를 조금 넣으면 도움이 될 겁니다. 비중이 무거운 스텐 316을. 직경 3미리 이상으로 구해서 넣으면 교반할 때 크게 튀지 않을 것 같아요.
알영양제꼭꼭  |  2021.06.09   

제가 추출한 물질이 소포체 인데 비드를 넣으면 손상되지 않을까요?

대왕개구리SPEED  |  2021.06.09   

질문이 정확하지 않으니까 여러가지 해결방법이 나옵니다.

당연히 bead를 넣으면 안됩니다.

울트라 돌리고 회수 물질이 세포 소기관이고 ppt로 회수하면 피펫칭도 

자제하는 것이 좋습니다.

그냥 회수 용매를 넣고 4도에서 ppt가 풀리도록 놔두는 것이 손상없이

회수하기에 좋습니다.

ppt외에 gradient를 조절해서 용액으로 회수하는 방법은 없나요?

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