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모든 실험을 clean bench에서 한다고 가정하면..
- PCA 배지를 plate에 혼합도말하고 열어놓고 말립니다
: 잘못된 실험방법입니다.
도말할 때 배양액을 충분히 마르도록 도말하고 따로 배지를 말리지
않습니다.
- 공시험에서 곰팡이가 하나 뜨더라구요
: 공시험이 아무것도 안한 배지인가요?
- 실험실에 공중낙하균했을때 곰팡이가 많이자라긴합니다.
: 실험을 clean bench에서 하면 별 관계없습니다.
무균룸이 아닌이상 어떤 공간에서도 곰팡이, 미생물이 존재합니다.
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레벨2
시데
(대학생)
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21.10.19 18:43
굳히지않고 plate를 닫으면 수증기가 생기는데 괜찮은가요??
- 질문은 정확히 설명하는 것이 좋습니다.
- 배지를 만들 때 열어서 굳히는 것이 아니라 혼합도말하고 열어놓고
말린다고 나와있습니다.
설명이 잘못된 겁니다.
- 배지를 굳힐 때는 완전히 열지 않고 약간 열어서 굳혀도 충분합니다.
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레벨2
시데
(대학생)
-
21.10.19 19:13
질문에 오해소지가있서 죄송합니다!
중첩도말을 위해 1차적으로 배지를 부어 혼합하고 말린후 2차적으로 위에 살짝깔아줍니다!! 이때 오염소지가 있는것이지요??
PCA 배지를 사용해보진 않았지만, 생긴 게 LB-agar 배지 같은 것이 만드는 방법은 크게 차이가 없을 것 같네요.
배지를 만들고나서 멸균 후에 클린벤치로 들어가게 되면, 배지가 담긴 용액은 멸균상태일테지만 flask나 bottle 바깥부분은 이동하는 중에 외부와 노출이 되기 때문에 완전히 멸균된 상태는 아닐겁니다.
배지를 들이붓는다면 flask나 bottle의 주둥이 부분에 있던 약간의 배지가 바깥표면으로 흘러내리다가 다시 부을 때 따라들어갑니다. (오염 포인트)
이건 70% 에탄올 뿌려도 해결이 안 되더군요. 그냥 조심하는 수밖에 없습니다.
cell culture 시 들이붓다가 몇 번 오염이 된 적이 있어 혹시나 이런 원인일까 싶어 답변 드립니다.
배지를 좀 급하게 굳혀야 한다면 배지 아래에 cool-rack을 두면 좀 빨리 굳습니다. (heating block이나 1.5ml tube rack 같은 것을 냉장고에 두었다가 사용하시면 됩니다.)
- 중첩도말을 위해 1차적으로 배지를 부어 혼합하고 말린후 2차적으로 위에
살짝깔아줍니다!! 이때 오염소지가 있는것이지요??
: clean bench에서 한다고 오염 확률이 0%는 아니지만 대부분의 경우
오염이 안됩니다.
만약 오염이 된다면 실험상의 문제 점이 있는 것이 아닐까 합니다.