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BioLab 최정욱 교수
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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 2009  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 PCR후 문제발생
PCR초보  | 2009.02.18 14:56
 답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
제가 Genomic DNA를 뽑아낸 뒤 TE buffer와 섞어서 PCR에 사용했거든요.
근데 제가 PCR을 할 영역은 3kb정도이고 Primer도 그렇게 맞춰서 짰는데요.
도대체 뭐가 잘못된건지 PCR product를 전기영동해 보았을때,
5kb정도의 밴드하나만 뜨네요.
뭐가 잘못된걸까요?;
프라이머는 프라이머 블라스트 돌려서 짠것이고 확실히 맞게 짠것 같은데..
도무지 원인을 알 수가 없네요.
#PCR 결과
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2009.02.18   
어떤 cell의 gDNA를 PCR에 사용하셨나요?
PCR초보  |  2009.02.18    
zebrafish의 gDNA를 사용했습니다.
대왕개구리SPEED  |  2009.02.18   
실제 gDNA 상에서 F/R primer사이의 길이가 3kb이고 primer에 문제가 없다면

3kb가 나오는 것이 정상입니다.

조건을 바꿔서 한번 해보시죠..

mRNA기준으로 product size를 예상하고 gDNA PCR을 하시면 예상 size는 100% 틀리게

나옵니다.

그렇게 하진 않으셨을거라고 생각합니다만..
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