실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Pull-down Assays
bacterial cell lysis 후 IP 실험 방법
레벨1 실험실학생 (대학생)
현재 ha tag 와 GST tag 가 각각 달린 2가지 protein (ex, A protein - his tag ,, B protein - GST tag) 의 interaction 을 확인하기 위해서 ip 실험을 계획하고 있습니다.
그래서 bacteria cell 에서 각 단백질을 키운 후 cell 수확을 하고, lysis 를 진행하면 각 단백질이 발현되어 있는 2가지 lysis sample을 획득 하게 됩니다.
그런데 ip 실험을 찾아보니, 이미 protein 들이 binding 되어 있는 lysis 를 이용해서 antibody를 처리하고, bead를 처리하는 것 같던데, 그럼 그냥 각 각 protein lysis 를 섞어서 해주면 되는 걸까요?
혹시 mammalian cell 에서는 다들 어떻게 진행했는지 궁금합니다.
또한 발현이 잘 되었는지 확인하기 위해 input 도 wb할 때 내리라고 하셨는데, cell lysis 한걸 그냥 wb 하면되는건가요?
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