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질문 tissue sectioning 실험 buffer 관련 질문드립니다.
알신우리(대학원생)  | 2022.04.06 18:40

 

 

안녕하세요.

처음으로 마우스 실험을 진행하다보니 궁금한게 있습니다.

마우스 실험 후 부검하여 조직을 확보한 후에 paraffin section을 진행하여 H&E staining 단계를 진행하려고 합니다.

마우스 실험 후 각 tissue를 formaldehyde fixation을 진행하고, 아래의 프로토콜을 이용하여 조직을 준비하였습니다. 현재 70% ethanol에 있는 상태 입니다. 

https://med.nyu.edu/research/scientific-cores-shared-resources/sites/default/files/nyu-histocoresample-prep-paraffin.pdf

 

제가 직접 sectioning을 진행할 수가 없어서 다른 기관에 의뢰를 하려고 하는데, 그쪽 기관에서는 포르말린에 고정되어있는 조직을 보내야한다고 합니다.

70% ethanol을 제거하고 바로 포르말린에 다시 넣어도 괜찮을까요?

아니면 xylene으로 넣어서 보내야할까요?

 

답변 부탁드립니다.

 

 

 

#histology
 
#paraffin section
 
#ethanol
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이jeongjjangii  |  2022.04.07   

일반적으로 H&E staining을 외부 업체에 의뢰할 경우

조직 적출 후 4% formaldehyde에 고정한 상태로 업체에 전달합니다.

에탄올은 위의 프로토콜에서 보셨다 시피 dehydration작용을 합니다.

파라핀 블럭을 만드는 과정 중에 포함되어 있지만 일정한 시간동안만

단계적으로 진행해야하므로 계속 담구어져 있는 상태라면 처음 고정한 상태에서 변형이 일어났을 것으로 예상됩니다. 

따라서 업체에서 에탄올에 있는 상태의 조직은 좋은 결과를 만들어 낼 수 없으므로 받지 않겠죠.

교수님께 사실대로 말씀드린 후 샘플을 다시 준비하는 것이 더 좋은 방법인 것 같습니다..

뒷다리Vaydor  |  2022.04.15   

일단 바로 section하지 않을 것이라면 70% ethanol에 카셋을 넣을 필요는 없습니다.  나머지 과정에 대해서는 윗분이 잘 설명해주셨네요

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