- master plate에서 2nd plate로 colony를 picking 해놓고 plamid 확인 후

맞는 plasmid의 colony만 액체 배양해서 보관하면 편합니다.

- 냉동 stock 할 때는 glycerol 15%~20% 정도 넣어야 합니다.

노하우라기 보다는 이미 mini-prep으로 검증된 e.coli를 가지고 stock을 만드는게 가장 베스트이긴 합니다 물론 stock 만들때 남은 것도 miniprep이든 boiling prep이든 해서 확인하구요

glycerol은 얼지 않도록 만들어 주는 요소라서 무조건 넣으셔야됩니다 문헌이나 정보에 따라서 %는 달라지기는 하는데 실험실에서 정한 protocol이나 문헌 잘보시고 진행하시면 됩니다

클로닝 insert vector 준비만 확실하다면 콜로니 2개 중 하나는 확실하게 target이 나옵니다.
(보통 90% 이상이 target일겁니다.)

sample당 stock 2개만 만들면 그리 번거롭지는 않을겁니다.

DNA 확인 후 다시 transformation하려면 개인적으로는 시간 낭비에 컴쎌 낭비라고 생각합니다.