실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
western blot background
레벨2 96호 (대학원생)
안녕하세요. western blot을 하는 와중에 membrane background가 엉망으로 찍혀서 band가 제대로 보이지 않은데
위 같은 사진들처럼 band가 명확하게 나오지 않고 수많은 점박이들과 같이 detection이 됩니다...
troubleshooting을 하기 위해 원인을 찾아보고 있지만 background가 저렇게 되는 경우 해결방안에 대한 부분을 찾지 못해 도움을 구하고자 합니다..
현재 의심가는 부분은
1. 1차 항체 농도가 높아서
2. 2차 항체 문제로 발생
3. X-ray 필름 상태 문제
4. blocking 제대로 되지 않아서
등으로 생각하고 있는데
western blot을 4번째 시도하고 있지만 언제는 깔끔하게 나오고 언제는 저 사진들처럼 나와서 잘 나와도 제대로 된건지 의문이긴 합니다..
도움을 주시면 감사하겠습니다ㅠㅠ
Bio마켓 프리미엄