실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
Reverse transcription PCR 결과 입니다. 조언 부탁드립니다....
레벨3 앨 (대학원생)
Reverse transcription-PCR 결과 사진입니다.
1.5 Kb single band가 떠야하는데 굉장히 희미하게 나오네요ㅜㅜ
[Reagent]
Buffer : 2
dNTP : 1.6
Primer(10 pmole) : 1 / Tm : 54 ~ 55
*Template : 1
Taq(1 u) : 1
DW : 13.4
*Template 경우, 2 ug RNA로 cDNA를 만들었습니다.
합성된 cDNA를 1X라 했을때
(1/2) (10^-1) (10^-2) (10^-3) 으로 진행했습니다.
[PCR condition]
Temp / Time
94 / 10
94 / 1
52 / 1
74 / 2
94 / 10
1. 1.5 kb band를 확실히 확보하기 위해서 조건을 어떻게 바꾸면 좋을까요?
2. Gel에 밑에 있는 프라이머? 들은 왜 생기는거죠?? 안나타나게끔 하고 싶어요...!
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