실험 Q&A Cell Biology > Cell Cycle
2-well dish에 cell migration
레벨5 oneday (대학원생)
안녕하세요. 제가 cell migration 실험을 하고 있는데 protocol이 없어서 고군분투하고 있습니다.ㅜㅜ
cell migration을 하기 위해서 ibidi회사의 2well dish를 사용하고 있습니다.
한개의 dish는 None, 한개의 dish에는 IGF-1처리를 하려고 합니다.
저희 위에 졸업하신 선배님의 결과를 그대로 해보기 위해서 논문만 보고 제가 알아서 하고 있는 중인데요. 순서로는
1. dish에 well당 셀을 3*10^5cell/ml , 70ul씩 seeding을 하고
2. 하루뒤에 셀이 가득 성장하면 starvation을 24시간을 하고
3. suction후 well을 핀셋으로 떼고
4. none- dish : fbs없는 배지만 넣고 , treatment-dish: fbs없는 배지에 igf-1을 넣어 원하는 농도를 만들고
5. dish에 2ml씩 넣고 바로 사진을 찍고
6. 2시간 뒤에 사진을 찍으려고 합니다.
교수님께서는 2시간이면 충분하다고 하셨는데 2시간이 되어도 셀이 0시간때와 동일합니다. 몇번의 실패로 한번 3일동안 인큐베이터에 그냥 둬봤는데도 셀이 이동하지를 않습니다. ㅜㅜ 제가 머가 잘 못된걸까요?.... treatment도 배지도 다 지금까지 계속 잘 사용하고 있는 시약들입니다.
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