안녕하세요!
Western Blot 실험중인 대학원생입니다.
이번에 처음으로 Ponceau Staining 정량을 하게되었는데 어려워서 질문 올려요!
저희가 지금 하고있는 방법은 프린터 스캔과 휴대폰 촬영 후 Image J 프로그램을 이용해서 정량하는데 손을 많이 타는 것 같고 정량값이 일정하지가 않는 문제가 있습니다.
정확한 다른 방법 있으시면 알려주세요,,,!!부탁드립니다!
- 시료를 단백질 정량 후 일정량을 전기영동하고 폰슈 염색은 전기영동 상태를
확인하면 되고 정량은 정확히 되지 않습니다.
ponceau로 염색한 후 그 membrane을 사진으로 찍어서 imagej로 정량하신다는 말씀이실까요...?
맞다면 정량은 말이 안 됩니다.
transfer후에 ponceau염색을 하셨을테고 당연히 western blot의 남은 실험과정(blocking, 1st~2st antibody부착)까지 진행한 후 detection한 결과를 가지고 정량하셔야 맞죠?!