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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 pET21b midi prep
알dreamjw0211(대학생)  | 08.09 17:23

pET21b를 실험실에서 사용하고 있는데요 

pET21b를 DH5a에 transformation해서 mini prep을 하면 yield가 높게 나오는데 scale을 키워서 culture한 뒤 midi prep을 하면 아이에 없다 시피 농도가 나옵니다. 

다른 사람이 해도 그래서 전 연구자 실험 노트를 봐도 midi prep을 진행해본 사람이 없더라구요 

 

답답해서 질문 남깁니다. 

pET21b vector는 원래 이런건지 알고 싶습니다. 다른분도 이러신가해서요 ..ㅜㅜ 

#pET21b
 
#mini
 
#midi
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  08.09 17:24  

- 전체적인 진행 방법을 설명해 주세요.

-_-  |  08.09 17:44   

의심가는 스텝이 하나 있긴 한데...

DNA펠릿 확인을 미디프렙할 때만 하나요?

 |  08.09 20:17   

midiprep kit를 어느 제조사껄 쓰시는지는 모르겠지만

miniprep과 다르게 준비하는 시약이 간혹 있기도 합니다.

제조사 매뉴얼 다시 한 번 정독해보세요.

개구리Coolzinc  |  08.11 11:33  

Midi prep 하실 때 DH5a incubation time을 얼마나 두시나요? 

눈으로 봤을 떄 충분한 OD값을 갖는다고 보이시는지요?

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