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지속적으로 위 문제가 발생하는건가요?
간헐적으로 위 문제가 발생한건가요?
이번 한번만 위 문제가 발생한건가요?
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레벨3
쿵쿠따리쿵쿠따
(대학원생)
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22.08.13 18:26
456님!
지금 같은 실험을 일주일에 두번씩 진행 중인데 이번주 두번 다 저렇네요 ㅜㅜ
전에 100V,2시간 했을 때는 괜찮게 나왔습니다 ㅜㅜ
그렇군요.
그러면, marker를 양쪽에 loading하고 transfer를 했을때, 동일하게 gel에서 PVDF membrane으로 transfer가 되었는가요?
Antibody는 dilution을 해둔걸 사용했나요, 새로 dilution 한걸 사용 했나요?
Ponceau S staining을 통해 PVDF membrane에 transfer가 잘된걸 확인 했나요?
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레벨3
쿵쿠따리쿵쿠따
(대학원생)
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22.08.13 18:46
마커는 잘 transfer 됐구요!
Antibody는 dilution 돼 있는 걸 사용 했습니다! 다만 별로 사용하지 않은, 최근에 만들어 놓은 안티바디 사용 했습니다.
폰슈 염색은 아직 진행하지 않았는데, 내일 해 볼 예정 입니다!
만약 폰슈 해서 염색이 안 된다면 transfer 시간을 조절 해야 할까요?
Marker가 문제없이 transfer되셨다니, ponceasu staining도 아마 문제 없겠내요.
아마도 transfer문제는 없는거 같은데, antibody dilution한거말고 새걸로 해서 해보세요.
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레벨3
쿵쿠따리쿵쿠따
(대학원생)
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22.08.13 21:14
네 감사합니다! ㅜㅜ
-혹시 글에 마지막 질문인 단백질 사이즈는 gel의 윗부분 부터가 큰 사이즈 맞지요?! 이젠 하다하다 여기서 실수한건가 싶어 여쭤봅니다 ㅜㅜ
-아 그리고 보통 1st antibody는 몇회까지 재활용이 좋을까요?!
질문 폭탄 죄송합니다ㅜㅜ