실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
dsRNA RT-PCR하려고 하는데 denaturation 단계가 궁금합니다.
레벨2 soor (대학원생)
제가 따라하려고 했던 논문에서는 dsRNA를 RT-PCR시에 Random hexamer + dsRNA mixture 를 95도에서 5분 정도 denaturation 후에 RT-PCR mixture (random hexamer 제외)를 넣고이후 과정을 진행하면 된다고 적혀있었는데요.
찾아보니까 또 다른데서는 dsRNA만 denaturation 후에 RT-PCR mixture를 넣으면 된다고 적혀있더라구요.
그런데 qPCR시, ct값에서 denaturation에 따른 차이가 나타나지 않아서요..
제가 denaturation을 잘못하는건지 궁금해서 이렇게 여쭤봅니다.
dsRNA를 RT-PCR시에 denaturation 단계를 어떻게 진행해야 하나요??
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