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BioLab 이은열 교수
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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 195  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 dsRNA RT-PCR하려고 하는데 denaturation 단계가 궁금합니다.
올챙이soor(대학원생)  | 08.17 13:19

제가 따라하려고 했던 논문에서는 dsRNA를 RT-PCR시에 Random hexamer + dsRNA mixture 를 95도에서 5분 정도 denaturation 후에 RT-PCR mixture (random hexamer 제외)를 넣고이후 과정을 진행하면 된다고 적혀있었는데요.

찾아보니까 또 다른데서는 dsRNA만 denaturation 후에 RT-PCR mixture를 넣으면 된다고 적혀있더라구요. 

그런데 qPCR시, ct값에서 denaturation에 따른 차이가 나타나지 않아서요..

제가 denaturation을 잘못하는건지 궁금해서 이렇게 여쭤봅니다.

dsRNA를 RT-PCR시에 denaturation 단계를 어떻게 진행해야 하나요??

#dsRNA
 
#RT-PCR
 
#denaturation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
알롤로야놀자  |  08.18 15:29  

확실하진 않지만 제가 실험할때는 cDNA 합성을 위해 RT를 진행할 때

제가 쓰는 R primer를 RNA에 넣고 먼저 5min holding 한 다음에

RT-mixture를 넣어서 cDNA를 합성했습니다.

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