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질문 COLO205 spheroid live/dead assay (invitrogen) 결과가 이상합니다!
알motherscoffee(대학생)  | 08.17 15:45
첨부파일 파일첨부: 220524 Fluo_BRIC_4.jpg (420 KB)
이미지 첨부파일

현재 체외 세포 배양 지지체 이용하여 세포를 키우고있는 대학원생입니다.

 

연구실에서는 1 mm의 두께를 가지는 직육면체 모양의 지지체를 이용하여 cancer cell spheroid를 키우고 있는데요.

최근에 invitrogen사의 live/dead imaging kit를 이용한 염색 결과가 조금 의아하여 질문 남깁니다.

 

방법은 아래와 같습니다.

staining solution : RPMI 1640을 1:1로 섞은 후

지지체를 넣어줍니다. (1.5 mL 튜브)

15분 incubation 후 PBS로 washing 후 이미징합니다.

 

사진을 보면, 세포가 live/dead 모두 염색된 경우가 있는 이미지가 얻어집니다. 세포 실험으로 경험이 많은 선배님 있으시면 답변 부탁드립니다!

#live dead
 
#live/dead
 
#세포배양
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