실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Pull-down Assays
단백질에 DTT처리 후 S-S결합이 재 결합된다면..
레벨1 리플라믹 (대학생)
안녕하세요? 제가 실험을 진행하다가, 단백질의 S-S 결합을 끊는 DTT처리 후 원래대로라면 Iodoacetamide(요오드 아세트 아마이드)라는 시약을 처리 했어야 했는데 이 시약이 다 떨어져서 (제가 너무 어리석었습니다..)처리하지 못한 채 다시 이전 과정의 상태로 보관중인데요.. 요오드 아세트 아마이드는 단백질의 S-S결합이 해제된 펩타이드의 -SH기에 알킬기를 첨가하여 S-S결합의 재형성을 차단하기 위한 처리입니다. 혹시 이렇게되면 이 단백질 샘플은 버려야하는게 맞을까요..? DTT처리 후 그대로 두면 S-S기 결합이 재 형성된다고 알고있는데, 그러면 원래의 펩타이드 형태로 잘 돌아올 수 있을까요..? 단백질 샘플을 만드는데까지 시간소요가 꽤 걸려 이렇게 질문드립니다. 읽어주셔서 감사합니다. (말디토프/토프 MS분석 전처리 과정 중 발생한 일입니다..!!)
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