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질문 cell seeding 이게 맞나요?
알오이(대학생)  | 2022.09.02 15:44

Cell seeding 시 세포수를 구하는 것에 대한 질문입니다.

학부생이라 이걸 제대로 이해한 건지 아닌지 확신이 들지 않아서요.

예시)1. 96well plate에 1x10^4cell을 seeding 할 겁니다.

저희는 96well을 전부 쓰지 않을 거고 96well 중에 7well에만 seeding을 할 예정입니다. 그러면 필요한 cell의 개수를 구할 때 96x10^4, 7x10^4중 어떤 식으로 계산해야 하나요?

2. 필요한 cell의 부피를 구하고자 합니다. 1ml당 10^3개의 세포가 있다고 가정합니다. 비례식을 세워보면 ?(96인지 7인지 모름)x10^4:xml=1x10^3:1ml이죠? 여기서 x값을 구하면 총 필요한 cell의 부피가 나오게 됩니다. 그리고 배양액의 부피도 구해야 하는데 7well(각 100ul)이니 700ul가 필요한 것이 맞나요...? 

3. 필요한 세포 부피가 3ml, 필요한 배양액 700ul라고 가정한다면 세포와 배양액을 섞어놓은 tube에 배양액 700ul까지 더 넣어서 잘 희석한다음 seeding을 하면 되는 것인가요? 

 

#cell culture
 
#cell seeding
 
#MTT assay
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리ʕ•ﻌ•ʔ뀨  |  2022.09.02   

1x10^4cells/well이니깐 well 당 1x10^4cell임으로 7well이면 최소 7x10^4cell가 필요합니다. 

 

1ml당 10^3은 예시가 적절하지 않네요.... 1x10^3cells/1mL 이기때문에 

10mL을 넣어야합니다. (1x10^3 X 10 cells/1 X 10 mL = 1x10^4 cells/10mL )

 

예시를 1x10^5 cells로 할께요. 

cell counting 시에 1x10^5 cells가 나왔으면

1x10^4 cells에 1mL을 넣어주게되면, 1x10^4 cells/mL 

1x10^4 cells/mL 에 10씩 나눠주면 1x10^3 cells/ 100uL 

즉 1x10^4 cells/mL 일때 100uL을 따서 well에 넣어주면 1x10^3 cells이 되죠.

 

cell seeding  계산은 사람마다 다른데, 

저같은 경우는 total cell양에서 필요한 cell양과 필요한 volume에 맞춰 계산합니다. 

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