실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
real time pcr 띄 없음
레벨1 생쪼 (일반인)
생명과학 고수님들 안녕하세요! 저는 고등학교에 다니고있는 학생입니다.
학교에서 구강상피세포를 이용하여 ACE 유전자 타입을 알아보는 실험을 했는데 모든 조에서 DNA 밴드를 관찰할 수 없었습니다 ㅠㅠ 예상되는 이유가 몇개 있는데
1. 히팅블럭 사용의 유무 ( 학교에 히팅블럭이 없어 그냥 끓는 물에 가열했습니다. 일정한 온도로 가열할 수 없었는데 이것이 세포막 파괴에 영향을 주었을까요? )
2. 피펫 사용 미숙으로 시료가 균일하게 섞이지 않았다.
3. Agarose gel을 만드는 과정에서 EtBr을 너무 높은 온도에서 섞으면 안된다고 알고있습니다. 이것이 사실인가요? 만약 사실이라면 이유가 무엇일까요? 또 저희는 실험 과정에서 ErBr이 아니라 생물나라의 SafeShine™ DNA Stain을 사용했는데 이 시약도 높은 온도의 Agarose와 섞으면 안되는 걸까요?
4. 실험이 예상보다 지연되어서 냉동보관이 필요한 시약들이 상온에 꽤 오랜시간(약 1시간) 방치되었습니다.
크게는 이렇게 4가지 이유가 있는데 고수님들께서 보시기에는 어떤 이유가 가장 가능성 있다고 생각하시나요? 그리고 pcr과정 말고 전기영동 자주 나오는 실수는 어떤게 있을까요?
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