[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
제이오텍
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 604  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Real-time PCR 실험 process를 짜봤는데 많이 이상한가요
개구리Crucial(대학생)  | 09.30 23:50

Cell에서 RNA 추출 후 cDNA합성하여 template로 사용하려고 합니다.

Housekeeping gene으로 GAPDH를 사용하고 샘플들 간의 gene A(예시)

발현량 차이를 Real time PCR로 비교하려고 합니다.

먼저 GAPDH와 gene A의 STD curve를 그려서 R^2=0.99 이상에서 

Eff%가 90~110% 안으로 들어오는지 확인합니다.

그리고 Melt Curve에서 sharp하게 하나의 peak만 뜨면 일단 primer에는

문제가 없다고 보고, 

샘플들 간의 gene A 발현량 비교를 위한 본 실험에 들어가려고 합니다.

교수님께서는 굳이 STD curve 그리지 말고 그냥 바로 본 실험 하라고

하시는데, primer 디자인이나 STD의 dilution factor 등 다른 요인은 빼고

위 과정 자체만 봤을 때 이상하거나 부족한 부분이 있을까요?

#Real-Time
 
#PCR
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리차몬드  |  10.02 14:35  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

제가 하는 방법이랑 달라서 얘기하신 방법을 잘 모르겠는데

저는 cycle 돌리고 거기의 ddCt 값으로 비교합니다

이걸 %로 나타내서 결과 냅니다

개구리Crucial  |  10.03 00:29  

저도 최종 결과는 ddCt값 보고 비교해서 그래프로 나타내거나 하는데

최종 결과를 내기 위한 실험을 하기 전에

primer의 PCR 효율을 알아보기 위해 STD를 해야하는지 궁금한 것입니다.

답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
스트레스없이 3D 세포를 배양해보세요!!
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Celvivo Demo모집! Request Form작성 후 신청시 80만원 상당 Celvivo Start K.. (12.28까지)
바이오클론 바이오클론
[Bioss] 겨울 맞이 행사 (12.30까지)
사이젠 사이젠
[Cyagen 슈퍼할인] KO마우스 무료 증정/녹아웃 카탈로그 모델 $2950 이상 할인 (12.31까지)
바이오클론 바이오클론
Biolegend 한국대리점 Biolegend 30% 할인행사 (12.30까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Azure Trade In Event!최대 40%할인 (12.31까지)
최근등록   더보기 >
시약 구매   12.06
조직 특이적 프로모터 관련 질문   12.06
EZ-Pure™ Plasmid Prep Kit. Ver. 2, EZ-Pure™ Gel E...   12.06
MTT assay에서 IC50값 차이   12.05
FAM probe 형광 발현 문제,,,,   12.05
주화세포에 바이러스 접종시   12.05
Cell seeding시 media   12.05
Ribogreen assay 정확한 원리를 알고싶습니다.   12.05
stable cell line 만들때   12.05
skeletal muscle cross section area 측정방법   12.05
최근답변자 우수답변자
알Steady

알mindfields

올챙이똑똑해지자

개구리Marine

알yjeu

개구리오이가싫어

개구리안녕난세포야

뒷다리실험은안될때가더많아

꽃개구리visavis

꽃개구리발그런

꽃개구리개그

개구리propadrum

개구리무광

꽃개구리juno

꽃개구리스카이

꽃개구리아라곤

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
필코리아테크놀로지 광고