실험 Q&A Chemical biology > Analysis
HPLC gradient 질문드립니다.(peptide inject)
레벨1 닁닁 (대학원생)
안녕하세요. peptide sample 조건을 잡으려 하는 중입니다.
샘플은 peptide 단일물질을 inject 하였습니다.
Gradient(A=0.05% TFA in water, B= 0.05% TFA in ACN)
min | A | B |
0 | 100% | 0% |
30 | 0% | 100% |
40 | 100% | 0% |
로 진행을 하였습니다.
30분까지 진행을 하고, 40분까지(10분동안) DW 100%로 하기 위해 다시 올라가는 gradient를 하였는데, 궁금한점은,
1. 0~30분사이와 30~40분사이에 똑같은 비율의 이동상이 있었을텐데, peak가 한쪽에서만 나올 수 있나요?
2. 단일물질 이어도 gradient를 하게되면 peak가 여러개가 찍히나요?
3. 2번질문에서 맞다면, 한 cycle에 나오는 모든 peak들은 다 동일한 물질이지만, 이동상에 따라 RT값만 다르게 나오는 건가요?(즉 같은 물질?이 한 그래프에 여러개가 나오는건가요?)
감사합니다...hplc 공부하는데 너무 어렵네요.ㅠ.ㅠㅠ
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