실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
restriction enzyme처리 후 DNA 전기영동 관련해서..
레벨2 형준팍 (대학생)
안녕하세요 학부생인데 실험하면서 결과 추론이 안되는 부분이 몇 가지 있어서 질문 드립니다.
1. 각각 형태가 다른 plasmid DNA를 전기영동하면 supercoiled form > linear form > nick (or circular ) form 순으로 band가 찍히는 걸로 알고 있습니다
만약 plasmid DNA의 크기가 1kbp라고 가정한다면, 전기영동을 하였을 때 linear DNA는 1kbp부근에서 band가 찍히고, nicked DNA는 1kbp보다 좀 더 큰 위치에서 band가 찍히는 것인가요?
2. insert DNA를 만드려고 DNA에 restriction enzyme처리 후 prep과정 거치고 전기영동을 해봤는데요 이상하게 몇몇 밴드는 다른 밴드보다 두껍게 나오네요
nanodrop 측정했을 때는 농도도 거의 비슷하고 모두 같은 양을 loading하였는데 무슨 문제일까요??..
전기영동 전에 실험하면서 오염된 유기용매에 의해 band 모양이 달라질 수 있나요?
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