실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
annexin v/pi staining
레벨3 암린이 (대학생)
안녕하세요오,, annexin v/pi staining에 대해 질문이 있습니다..ㅠㅠ
제가 사용할 kit는 BD bio의 cat. 556547 FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I 인데요
protocol에
Staining
1. Wash cells twice with cold PBS and then resuspend cells in 1X Binding Buffer at a concentration of 1 x 10^6 cells/ml.
2. Transfer 100 µl of the solution (1 x 10^5 cells) to a 5 ml culture tube.
3. Add 5 µl of FITC Annexin V and 5 µl PI.
4. Gently vortex the cells and incubate for 15 min at RT (25°C) in the dark.
5. Add 400 µl of 1X Binding Buffer to each tube. Analyze by flow cytometry within 1 hr.
이렇게 써져 있는데, Annexin V와 PI를 넣은 후 원심분리로 상층액을 제거하지 않는걸까요??
마지막에 400 ul의 binding buffer를 추가해주는데 그게 원심분리를 하지 않아도 되는 이유인가요??
답변 부탁드립니다 고수님드을 ㅠㅠㅠ...
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