실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Pull-down Assays
streptavidin pull down 시 washing (?) 문제
레벨2 움가 (대학원생)
지금까지 purify 한 protein 으로 in vitro streptavidin pull-down 실험을 잘 진행하고 있었는데, streptavidin agarose 제품을 기존에 쓰던 것에서 다른 것으로 바꾼 이후부터 non-specific band 가 뜹니다.
정확히는, biotin 이 들어있지 않은 sample 에서 protein 이 streptavidin 에 binding 했다는 결과가 나오고 있습니다.
단순히 washing 문제라고 하기에는 agarose 를 바꾸기 전까지만 해도 멀쩡히 실험 결과가 잘 나오던 터라, 다른 문제가 있나 싶어 질문 올립니다.
이전에 쓰던 제품은 Novagen 69203 이고,
현재 문제가 발생한 제품은 sigma s1638 입니다.
저로서는 이 둘이 큰 차이가 없다고 판단했고, 동일 protocol 을 사용했습니다.
조언 부탁드립니다.
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