실험 Q&A Chemical biology > Analysis
HPLC로 분석 중 sample 속 분석 물질 검출 질문입니다!
레벨1 베지밀두유 (대학원생)
안녕하세요 HPLC를 이용해서 sample 내 존재하는 물질 양을 확인하고 있습니다.
실험 중 결과값이 예상과 다르게 나와 올바른 과정을 통해 분석을 하고 있는지 궁금한 점이 생겨 질문드립니다.
사용하는 기기는 agilent 1200 이며 DAD와 FLD 모두 사용하고 있습니다.
이동상으로는 물과 ACN을 사용하였습니다.
우선 분석을 위해 standard는 25ppb, 50ppb ,100ppb, 250ppb, 500ppb, 1,000ppb 6단계로 standard curb를 그렸습니다.
이후 kit를 사용해서 sample 내에서 분석 물질을 추출하려 하여, kit를 거친 후 분석 물질들이 남아있는지 확인하기 위해
Negative control 로는 ACN을 sample만큼 넣어서 분석 물질이 없는 상황에서 kit에 의해 확인 될 수 있는 양을 확인하였고,
Positive control로는 100ppb의 Standard를 sample만큼 넣어서 Kit를 거친 후 분석 물질들이 얼마나 회수되는지 회수율을 확인하였습니다.
위 과정을 거쳤을 경우 sample에서 Blank값을 다 빼준 후 Standard 의 회수율을 보정해주면 sample내 존재하는 분석 물질의 양을 확인할 수 있는게 맞을까요?
첨부한 사진은 500ppb Standard 를 분석한 값으로 위에서부터 DAD, FLDa,b,c 입니다.
질문 봐주셔서 감사합니다.
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