실험 Q&A Cell Biology > Transfection
MG1655에서 protein overexpression
레벨1 생물깎는대학원생 (대학원생)
안녕하세요, 벡터 관련해서 질문하고 싶습니다.
MG1655에서 mutant protein을 overexpression (혹은 그냥 expression)해야 하는 상황입니다.
단백질에는 His tag 가 달려 있게 sequence를 구성해야하고, 현재 pET21b vector 안에 sequence가 들어있는 plasmid로 BL21에서 발현시키고 있었습니다. IPTG를 사용하고 있어요.
1. 그런데 MG1655를 사용하게 되면 T7 promotor가 사용되는 pET vector는 사용하지 못할 것 같은데, 다른 vector가 뭐가 있을까요?
2. MG1655에서 protein을 overexpression 하는 것이 가능한가요? 저는 genomic DNA 뽑을 때만 MG1655를 써봐서 이게 잘 자랄지조차 모르겠습니다..
3. 만약에 MG1655에서 단백질을 뽑을 수 있다면, antibiotics를 사용하시나요?
처음 해보는 실험이라 질문이 많아 죄송합니다. protein overexpreesion with MG1655, MG1655 protein expression, MG1655 protein vector 등등 구글에서 검색해봐도 뭐가 안나오네요...
감사합니다
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