실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
단백질 발현 시 크기
레벨2 Worker (대학원생)
안녕하세요. 저희 실험실에서 단백질 발현 시에 over-expression vector로 pET28a(+), pET32a(+) vector를 사용합니다. 저희 실험실에 선배가 알려주시기를 과발현된 단백질의 크기를 확인할 때 pET28a(+) vector는 5kDa, pET32a(+) vector는 15kDa를 더해서 제 단백질 크기를 정하면된다고 하십니다. 저희 실험실에서는 주로 N-terminal의 His-tag를 사용하는데요. 제가 pET28a(+)를 사용한다고 하 때 N-terminal의 His-tag - Bam H1까지 아무리 계산해도 5kDa가 안나오거든요... 단백질 크기를 계산할 때 어디서부터 시작해서 크기를 계산해야하나요???
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