실험 Q&A Immunology > Immunofluorescence
면역형광염색 IF 1차, 2차항체 확인 부탁드립니다 + 관련질문
레벨1 세포실험초보입니당 (대학원생)
3종류의 다른 단백질의 발현을 확인하고 싶어서 triple로 IF를 진행하려고 합니다.
처음 해보는거라 불안한데 물어볼 선배가 없어서요ㅠㅠ 도움 부탁드려요.
<primary antibody>
1. Mouse 유래
2. Rabbit 유래
3. Gout 유래
<secondary antibody>
1. Donkey anti-Mouse IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 488
2. Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 594
3. Donkey anti-Goat IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 647
+ 추가적으로 질문드립니다.
위와 같이 염색진행 후, 동일한 sample에서의 ER이나 mitochondria와 같은 subcellular 구조를 염색해서 단백질 위치를 확인하려고 합니다.
연구실 항체리스트를 보니까 subcellular marker의 primary antibody가 전부 rabbit 유래인데, 위의 2번째 단백질 primary antibody를 rabbit 유래를 썼는데 또 다음 염색에서 동일한 host꺼를 사용해도 되는지 궁금해서요ㅜㅜ
사용해도 된다면, secondary antibody 선택 시 alexa 488, 594, 647을 제외한 색의 anti-rabbit 항체를 선택하면 되나요?
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