실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
단백질 전기영동 밴드 끌림 현상 관련 질문드립니다.
레벨1 ㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎ (대학원생)
안녕하세요
단백질 전기영동 실험을 진행하고 있는데,
계속 밴드 끌림 현상이 생기고 있고 ㅠㅠ 여러 troubleshooting을 진행해보았으나 소용이 없어서 western blot 고수님들의 조언을 구하고자 합니다.
실험 조건은 다음과 같습니다.
1. C57BL/6 마우스 대장 조직 homogenate(상등액)
2. lane당 단백질 20 ug
3. Homogenate 샘플을 SDS loading buffer와 섞은 후 100도에서 15분 가열
4. lane당 샘플 10 ul씩 로딩
5. 전기영동 조건 200 V, 35분
6. Gel: bio-rad Mini-PROTEAN TGX gels (10%)
Running buffer도 늘 새로 만들어서 충분한 양을 넣어서 실험하고 있고,
Gel 밑의 테이프도 잘 떼어서 사용하고 있습니다.
사진도 첨부하였으니
조건과 결과에서 제가 혹시 놓치고 있는 부분이 있는지 코멘트해주시면 정말 감사하겠습니다!!
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