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천연 항생제의 디스크 확산법 실험 실패 원인이 뭔지 알고 싶습니다
레벨1 콩자반 (일반인)
안녕하세요 고등학교에서 과제 연구를 진행하고 있는 고등학생인데.
저희가 쑥 추출물, 항생제를 사용해서 농도별 항생제 감수성 비교 실험을 하였는데 농도별로 큰 차이가 없었습니다. 그 원인을 알고 싶어 질문드립니다.
시료의 제조
1. 아세톤 100% 100ml에 쑥 100g, 75g, 50g, 25g 사용하여 상온에 3일(72시간)동안 침지해둔다.
2. 1번에서 제작한 혼합물을 감압여과하여 쑥 추출물을 얻는다.
3. 항생제 20ml와 증류수 200ml를 섞어 10배 희석된 항생제를 만든다.
4. 3번에서 제작한 항생제에서 20ml를 추출하여 증류수 200ml에 희석해 100배 희석된 항생제를 만든다.
5. 4번에서 제작한 항생제에서 20ml를 추출하여 증류수 200ml에 희석해 1000배 희석된 항생제를 만든다.
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황색포도상구균에 대한 쑥 추출물의 항생제 감수성 측정
1. 페트리 디쉬 9개에 각각 패이퍼디스크를 3개씩 넣는다.
2. 1개의 페트리 디쉬에 페이퍼디스크에 100% 쑥 추출물을 2㎕ 흡수시킨다.
3. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 75% 쑥 추출물을 2㎕ 흡수시킨다.
4. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 50% 쑥 추출물을 2㎕ 흡수시킨다.
5. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 25% 쑥 추출물을 2㎕ 흡수시킨다.
6. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 항생제을 2㎕ 흡수시킨다.
7. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 10배 희석된 항생제을 2㎕ 흡수시킨다.
8. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 100배 희석된 항생제을 2㎕ 흡수시킨다.
9. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 1000배 희석된 항생제을 2㎕ 흡수시킨다.
10. 1개의 페트리 디쉬의 페이퍼디스크에 증류수를 2㎕ 흡수시킨다.
11. 시료를 흡수 시킨 패이퍼디스크를 20분간 건조시킨다.
12. 9개의 배지를 90도씩 돌려가면서 면봉으로 황색포도상구균을 펴바른다.
13. 농도별 추출물과 항생제, 증류수를 흡수한 페이퍼디스크를 세균을 묻힌 배지 시료별로 올린다.
14.배지 뚜껑을 닫고 상온에서 24시간동안 배양시킨다.
저희는 농도가 낮아 세균 배양이 억제 되지 않거나 배지를 일정한 온도로 유지해주지 못한 걸로 추측하고 있는데 다른 분들의 생각이 궁금합니다.
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