실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
pfu polymerase로만 뜨면 안떠집니다
레벨1 파채부락리 (대학원생)
안녕하세요
현재 cloning을 하기 위해 PCR을 진행하고 있습니다.
3,600bp 정도 되는 insert를 PCR 뜨고 있는데
문제는 pfu pol이 아닌 그냥 taq pol을 써서 뜨면 잘 떠지는데
pfu pol로 뜨는 순간 바로 밴드가 안뜨더라구요..
아무래도 3.6kb 정도 되는 insert를 따다 보니 막택으로 뜨면 잘 떠지더라도 sequencing을 해보면 point mutation이나 deletion이 되어 있더라구요.. 그래서 pfu pol로 뜨고 싶은데 같은 회사 polymerase라도 pfu냐 taq이냐 에 따라 안떠지는데 이럴 땐 어떻게 해야하나요ㅠㅠ
Bio마켓 프리미엄