실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
cDNA 합성에서 헷갈리는 부분이 있습니다.
레벨5 ziiion (대학생)
RNA template에서 oligo dT나 random hexamer와 Reverse transcriptase를
사용해서 RNA-DNA helix를 생성하고 RNase H를 사용해서 RNA만을
분해한 다음(ssDNA만 남고), DNA polymerase로 dsDNA로 합성해준다고
알고 있습니다.
그런데 여러 회사에서 파는 cDNA 합성 kit에는 왜 DNA polymerase가
없는 건가요? 그냥 RNA-DNA helix를 PCR에 사용하는 건가요?
그리고 저희 실험실에서는 Bio-RAD의 iScript cDNA synthesis kit를
사용하는데, 여기서 제공되는 RT는 RNase H+라고 하더군요
근데 RNase H는 RNA를 분해한다고 하는데, 그럼 최종 합성 prouct가
sscDNA로 남는걸까요?
Bio마켓 프리미엄