전기천공법으로 plasmid를 transformation하고 다음 날 확인했는데, 크고 하얀 콜로니 주변으로 자잘한 콜로니들이 에워싸듯이 몰려있거나 아예 하얀 콜로니들을 뒤덮고 있었습니다.
지금 저 이상한(?) 콜로니들을 새로 만든 amp 배지에 streaking 하면 순수한 transformant만 얻을 수 있을까요? 아니면 다시 transformation부터 다시 진행해야 할까요?
*배지는 알아보니 만든지 좀 되었더군요... 일단 저도 앞으로 쓸 일이 있을거 같긴 해서 새로 만들었습니다.
둘 다 해보세요.
전자가 잘 되면 시간절약돼서 좋고, 전자가 잘 안 되어도 후자가 있으니 백업으로 바로 쓰면 되니깐...
satellite는 ampicillin 배지에서 자라지 않습니다.
암피실린 내성유전자인 b-lacatmase가 암피실린을 분해하면 transformant 주변의 암피실린 농도가 낮아지기 때문에 non-transformant들이 자랍니다. 그것이 satellite인 것이죠.
satellite가 자란 중심에 있는 colony만 찍어서 분석하시고 satellite는 버리세요.
실험할때 보면 kana같은경우는 안그런데 유난히 amp배지에서 satelite가 일반적으로 관찰되더라구요.
강시님 말씀대로 하시면 별 문제 없을겁니다.
SPEED
토라
롱암몽키
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해조칼슘풍덩
실전 실험 프로토콜 101
후배에게 주고 싶은 면역학 노트
