실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
overlap pcr
레벨5 얼마안남았다 (대학생)
vector에서 50bp만 원하는 gene으로 바꾸기 위해서 pcr을 진행했는데 원하는 원래대로 라면 3kb의 band가 나와야되는데 pcr만 하면 700bp가 나와서 원하는부분에서 pcr이 된거같지 않아 overlapping pcr로 이어 붙여 만들려고 합니다. 제가 overlap은 처음이라 궁금한게 많아 질문드립니다. 1. 지금 제가 가지고 있는 vector가 circular인데 우선 이걸 linear로 자르고 시작해야되는건가요? 2. 제가 원하는기존에 있던 gene이 아닌 원하는 gene을 넣어주기 위한 pcr fragment, 기존에 잘라서 이어붙이는 fragment부분 해서 2개를 이어붙이는건지… 아니면 기존 circular를 2개의 fragment로 잘라서 총3개의 fragment를 이어붙이는건지 질문드려도 될까요?
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