[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
MCI
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
피부 마이크로바이옴 연구 동향
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 450  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 FAM probe 형광 발현 문제,,,,
알할까말까해(대학생)  | 2022.12.05 20:57

안녕하세요, 제가 하다하다 안돼서 이곳에 글을 남깁니다.

제가 얼마전부터 NTC 샘플에서 계속 형광이 증가가 되는 문제가 발생하고 있는데요, 처음에는 오염인줄 알고 시약도 다 새로 주문을 해서 실험을 계속 하고 있는데 여전히!!! NTC 샘플에서 형광이 선형적 증가을 하고 있습니다.

혹시나 해서 gel도 내려봤는데 당연히!!!! amplicon은 보이지 않고요,,,,

Probe에 손상이 갔나해서 새로 주문을 하고 별짓을 다해도 계속 이런 문제가 발생하네요,,,,

사용하고 있는 Probe는 FAM-TAMRA 입니다,,,,

upload_image

도대체 왜 그런지 작은 힌트라도 좋으니,,,PCR 고수님들 tip좀 주세요~~~~

 

#qPCR
 
#FAM
 
#False
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리AstV  |  2022.12.06   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
제 생각엔 NTC 샘플이 오염된 것 같습니다

시약도 다 바꿔봤고, 원래 증폭이 안되던 NTC에서 어느 날부터 증폭이 된다면.. NTC샘플 오염된 것 같네요

그리고 taqman probe 사용할땐 amplicon size가 100bp 이내로 짧게 프라이머 프로브 디자인을 하는데..., 젤 사진 아래쪽에 뭔가 밴드같은게 있어 보이는데 NTC샘플 대신해서 순수한 DW로 PCR한 결과도 비교해보시면 좋을 것 같습니다.
(래더 크기 정보가 사진에 없고..젤이 울어서 확인이 어렵네요)

예전에 저는 중요한 실험 할때 positive, NTC샘플, 그리고 그냥 DW도 PCR 걸어서, 같이 확인했습니다.
답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
인성크로마텍 인성크로마텍
[Fluidic Analytics] Complex background 에서의 농도(conc.) 및 결합 친화..
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN No.1 한국공식대리점] TECAN NGS 전처리 자동화 System MagicPrep™ 이벤트 (3.4까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
효율적인 Genome Editing의 필수조건은?
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Phytotech Labs의 DKW based Media Optimization Kit로 까다로운 Plant.. (1.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (4.11까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN한국공인대리점] TECAN 자동화장비 신년맞이 상담 이벤트 (3.31까지)
최근등록   더보기 >
안녕하세요 Campylobacter를 배양하려고 하는데요 질문이 있습니다   01.27
cell cycle 분석을 위한 PI staining시 control에 sub G1 문제   01.27
세포해동   01.27
JNK 질문이요   01.27
시퀀싱에서 점돌연변이가...   01.27
금나노 합성 실험   01.27
H2O2농도별 IC50   01.27
뿌리에 흰 솜털 같은 것이 나는데 곰팡이 등에 의한 오염인지 알 수 있을까요?   01.27
직선성 실험 검체   01.27
직선성 실험   01.27
최근답변자 우수답변자
개구리무광

올챙이공룡알

알Lanna

뒷다리대학원생(진..

개구리cslee

알karan

대왕개구리강시

앞다리ghtlr21

대왕개구리SPEED

꽃개구리visavis

꽃개구리Jake

꽃개구리개그

개구리달려라~

개구리secu

개구리별숲

개구리빛초롱

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
엘앤씨바이오 광고