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Knockout mouse breeding(mating) 방법 잘 아시는분? 도와주세요!
레벨5 귤여섯개 (과기인)
안녕하세요?
최근 Crispr-Cas9을 이용한 gene Knockout 마우스를 구매했습니다.
이 마우스 breeding과 관련해서 몇가지 질문이 있습니다.
1. 이 마우스는 B6/N의 ES cell에 바로 Crispr를 사용해서 만든 KO으로 알고 있는데요, 이렇게 되면 기존 KO 방법으로 만들어지는 hybrid가 아니기 때문에 backcross를 안해도 되는건가요?
2. 그리고 KO을 얻어내는 breeding setting시에 hetero x hetero 교배가 정석이겠지만 KO x KO으로 사용해도 괜찮을까요?
3. 2번 질문에 이어서, 기존 KO 제작 방법의 hybrid로 만들어진 경우엔 아무리 backcross를 거쳐도 100%의 inbred 가 아니라서 WT x WT , KO x KO 으로 pup을 얻어내면 genotype간에 KO gene 외의 유전적 동질성이 흐트러지기 때문에 WT을 대조군으로 쓸수 없는 것으로 알고 있습니다. 그래서 hetero끼리 얻어진 littermate을 사용하는 것으로 배웠는데요, 현재 이 마우스는 hybrid가 아니고 KO gene 만 타겟팅 된 것이기 때문에 나머지 유전자들은 inbred와 동일하다고 볼 수 있을까요?
유전학, 수의학, 분자생물학 등등 전문가님들의 고견 부탁드립니다!
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