실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Sequencing
biallelic mutation sequence 확인 방법
레벨2 움가 (대학원생)
CRISPR-Cas9 을 통해 frame shift knockout 후 selection 과정을 거쳐 knockout single cell line 을 획득했는데요, 이 cell 의 genomic DNA 를 sanger sequencing 할 경우 Cas9 target site 에서 서로 다른 두 signal 이 중첩되어 나타납니다.
저는 해당 sequencing 결과를 보고 homologous chromosomes 에서 Cas9 에 의해 서로 다른 indel mutation, 그러니까 bialleleic mutation 이 나타난 것이라 추측했습니다.
이 경우 각 allele 의 sequence 를 각각 따로 확인하는 방법이 있을까요?
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