실험 Q&A Cell Biology > Transfection
293t cell lipofection시 cell 떨어짐
레벨1 cheong (대학생)
이제 cell 실험 시작한지 두달 정도 된 새내기 입니다 293 cell에 특정 plasmid를 넣어서 유전자 발현량을 확인하는 실험을 하는 중입니다 cell에 lipofection으로 lipofectamine 2000 opti-mem으로 transfection을 하고 지금은 24well에서 진행중입니다. plasmid와 lipo incubation 후 기존 배지(dmem) 반정도 제거 후 treat하는데 plate에서 세포가 너무 많이 쉽게 떨어지는데 잘 안떨어지게 하는 방법이 있을까요? well을 기울인 후 200ul 정도를 조심히 넣어주고 있는데 항상 solution 넣는 well 아래 부분보다는 중앙부분과 위쪽에서 더 많이 떨어집니다 ㅠㅠ 기울여서 처리하는 과정에서 cell이 공기중에 오래 노출되고 분주하는 과정에서 plate가 흔들려서 그런건지 pipet으로 조심히 넣는다고 하는데 pipet 다루는게 미숙해서 그런지 절반 정도 까지 떨어지는 것 같네요 조언받을 만한게 있는지 여쭤봅니다
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