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 전체 > Cell Biology > Transfection
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질문 Transformation
알brintelix(대학생)  | 01.18 11:06

안녕하세요 E. coli transformation실험을 진행하고 있습니다, Electroporation 방법으로 transformation을 진행하였는데 pulse를 주고 SOC를 바로 넣어준다음 37도 인큐베이터에서 120 rpm으로 shacking incubate를 진행하였더니 cell debris가 실처럼 가라앉아 발생하였습니다. 원인을 찾고싶은데 정보가 살짝 부족한거같아서 글 남겨봅니다.. 그리고 cell debris로 인해 transformation yeild가 치명적으로 떨어지나요??
#transformation
 
#debris
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  01.18 11:33  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

electroporation을 하면 electric shock 때문에 대부분의 cell이 죽습니다.

살아남은 cell 중 일부가 plasmid를 얻어서 colony를 만듭니다. 마지막에 봤을때 예전보다 cell debris 가 많이 보였다면 대장균을 많이 사용했다던가 죽어서 터져버린 cell이 많다는 이야기입니다.

효율은 이미 좀 낮아졌겠지만 colony가 나오면 된겁니다.
대왕개구리SPEED  |  01.18 11:48  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
전혀 문제 될것이 없습니다.

전기충격을 줘도 e.coli가 죽지않고 최적 조건에서 TF 효율이 1 x 10^9 ~ 10^10/ug plasmid 정도 나옵니다.
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