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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
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질문 GST purification 과정 중 ethanol 이 첨가될 시의 문제점
알움가(대학원생)  | 01.18 18:21

GST-tag protein purification 과정 중, 실수로 그만 GST sepharose bead 를 washing 하지 않고 그대로 cell lysate 와 혼합해버렸습니다.

해당 bead 는 100% ethanol 1:1 slurry 상태로 보존된 것이라, 아마 제 lysate 20ml 에 대략 500ul 정도의 ethanol 이 첨가되었다고 추측됩니다.

이 경우 purification 과정, 혹은 purification 된 protein 의 activity 등에 문제가 생길지 궁금합니다.

열심히 E.coli 키워서 가장 마지막 bead binding 단계에서 이러니 너무 허탈하네요...

#purification
 
#protein
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
456  |  01.18 20:15   

단백질마다 다 다르니 문제가 있을수도 없을수도 있겠죠.

그냥 다시첨부터 하는게 정신건강에 좋습니다

..  |  01.19 16:19   

그냥 쓰셔도 됩니다

개인적으로는 bead를 equil 시키지 않고 보존액에 담긴 채로 사용합니다.

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