단백질 loading 양이 많아서 그럴 수도 있습니다.

희석해서 loading해보세요.

cell lysate라면 단백질 양을 10-20ug 이내로 사용하는 것을 기본으로 하고

필요에 따라 가감하시는 것이 좋습니다.

조건 잘 잡아서 해결될 수 있으면 좋겠지만.. 

1. 사용된 reference가 많은 검증된 항체인가요? 

2. 어느 회사 제품인가요? CST는 자기들 경험에 의하면 자기들 항체는 phospho protein을 볼 때 skim milk로 블럭해도 문제 없다고 skim milk로 블럭하라고 합니다. 

3. 다른 샘플(다른 cell line이나 tissue)에서도 원하는 밴드가 안보이고 잡밴드가 많이 나오는지

이런것들도 고려해서 영 아니다 싶으면 다른 항체 도입하는게 시간 물자 낭비 안하는 길일 수 있습니다. 

지나가다 궁금한 점이 있어 불쑥 질문 드립니다...

혹시 phospho 항체는 왜 skim milk를 쓰면 안되는걸까요 ...?

무지한 질문 죄송합니다ㅠㅠ 아시는 분...

친절한 답변 미리 감사드립니다!