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dilution refolding 테크닉
레벨1 미틈틈 (대학생)
protein folding에서 dilution refolding 방법을 사용하려고 하는데요. 그 중에서도 pulsed dilution으로
20-fold refolding buffer에 denatured protein sample을 일정량 피펫으로 넣고, stirring 하면서 일정시간후에 다시 넣는 방법을 채택하고 있습니다.
그런데 protocol을 검색해 봐도 예시로 100ul 넣고 1min 기다리는 식으로 넣는다, 이런 식으로는 나와있지 않더라고요.
이미 졸업한 선배가 진행한 실험을 재진행하는 중이라 조언을 구할 선배가 없습니다ㅠ
1) denature protein sample을 refolding buffer에 넣는 양과 기다리는 시간은 어떻게 정하나요?
2) 피펫으로 protein sample을 넣을 때 팁을 refolding buffer 안에 넣은 후 조금씩 돌리면서 분사한다거나, 아니면 그냥 한번에 분사하거나, 위에서 방울방울 떨어뜨리거나 방법의 차이에 따라 유의미한 차이가 있을까요?
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