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 전체 > Cell Biology > Transfection
조회 916  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 siRNA Transfection 후 western blot 밴드 변화
알uuy(대학생)  | 02.05 11:59
siRNA 처리 후 6시간 뒤 Media Change 진행 후 48 시간 뒤에 Harvest 하여 진행하였습니다

Havest전 cell morphology상에서 transfection이 확실하게 이루어 진 것은 확인하였으나
westen blot band상에서는 control과 siRNA의 차이가 전혀 없습니다

Media change하고 시간을 48시간 보다 더 두어보는 것이 방법일까요??
도움 좀 얻고 싶습니다
#siRNA
 
#transfection
 
#western blot
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리bio  |  02.05 22:49  

이미 만들어진 단백질이 degradation이 되지 않고 있으면 차이를 western으로 확인 어렵습니다. 

qPCR로는 확인 하셨나요?

개구리이스  |  02.07 04:20  

"Havest전 cell morphology상에서 transfection이 확실하게 이루어 진 것은 확인하였으나"

morphology로 transfection이 되었다는 것이 확인이 되나요? siRNA에 flourescence conjugation되어 있나요?

이런저런 문제로 인해 Western blot으로 knockdown 확인이 되지 않는다면, qRT-PCR로 우선 확인해 볼 수 있습니다.

 

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