사진이 작아서 잘 보이지 않으나

좌측 HepG2는 동글동글해보이네요,

확실히 정상 morphology는 아닙니다.

우측 HepG2는 약간 각진 모양에 제멋대로 이리저리 삐죽삐죽 생겨보이는데 괜찮아보입니다. 원래 HepG2가 좀 못생긴 cell이에요. 그런데 density가 좀 낮은것 같아요.

저는 2x10^6 cell/75T 정도로 seeding해서 3일이상 culture후 sub-culture해주는 식으로 maintain했습니다.

저도 연구실에 있는 cell을 풀어보니 사진 좌측같은 모양의 HepG2였던 적이 있는데, 저는 그냥 한국세포주은행에서 HepG2 새 stock을 분양받아서 사용하고 있습니다.

콜라겐 코팅 없이 일반 cell culture flask에 배양해도 morphology 잘나오고 잘 자라요. 

콜라겐 코팅 번거로우시면 그냥 새 line 하나 분양받는것도 좋아보입니다.

답변 감사합니다 :)

두 세포는 같은 vial에서 나온 걸 각각 풀어본 거라

density가 좀 낮습니다..ㅎㅎ

저번에 세포주은행에서 일반 플라스크에서 thawing했을때 잘 부착되지 않고 자라는 속도가 너무 더뎌서 ㅜㅜ 콜라겐 코팅을 했는데 그나마 나은 거 같아서요..ㅎㅎ

이번에 새로 받는 동결 바이알은 콜라겐 코팅한 플라스크에 풀어보려고 합니다.

혹시 아이이이잉님이 쓰시는 세포 배지 조성을 알 수 있을까요?

Eagle's Minimum Essential Medium with eagle's salt, L-glutamine, 1mM sodium pyruvate, 1500mg/L sodium bicarbonate 

(welgene #LM007-54; ATCC의 #30-2003 배지와 가장 유사한것으로 골라씁니다)

위 medium에 

FBS 10%, 1X Pen-Strep 섞어 쓰고 있습니다.

그리구 HepG2가 처음엔 원래 자라는 속도가 좀 느립니다. ㅎㅎ

그리고 얘네들이 퍼져서 자라지 않고 섬을 형성하듯이 모여자라는 습성이 있어서 더 그렇게 보여요

네 감사합니다 ㅎㅎ! 사실 세포 바이알은 2-3번 새걸 받아서 써봤는데

배지를 바꾸고, 플레이트 조건도 계속 바꾸느랴 안정적인 컬처를 너무 하고 싶네요 ㅜㅜ 저도 배지는 은행에서 쓰는 배양액이랑 가장 조성이 유사한 welgene 제품을 쓰기는 하는데 조언해주신 부분 참고해서 잘 배양해 보도록 하겠습니다.

좋은 하루 보내세요 ^^!