실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
Exosome isolation 후 western blot확인
레벨1 liilllijlijl (과기인)
여러 sample(Cultrure media/Urine/Serum/Plasma...)에서 exosome을 다양한 방법(Ultracentrifuge, PEG kit, filtration 등등)으로 isolation 후 각 방법별로 효율을 비교하고자합니다.
이때, protein 정량 후 protein의 양을 맞추고 loading하는 것이 맞을까요?
아님 yeild의 개념으로 같은양을 loading하는 것이 맞을까요?
ex] 만약 모든 방법을 동일하게 sample 1ml으로 start하여 마지막 elution을 50ul으로 한다면
a) 50ul를 정량 후 20ug씩 loading
b)추출 효율 비교니까 모두 동일하게 20ul씩 loading
사실 두방법 모두 실험 해봤지만 그렇게 큰 차이가 나지는 않습니다. 논문이나 각 commercial kit을 flyer를 찾아보면 western blot후 확인하던데 method을 봐도 그런거까지는 말해주지 않으니까요...
Exosome을 주로 실험하시는 분들은 어떻게 western을 하시는지 궁금합니다!
Exosome을 연구하시는게 아니더라도 다양한 분들의 의견이 궁금합니다.
다양한 의견 부탁드립니다!
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