실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
WB 실험 시 protein 양이 모든 marker에서 동일해야 할까요?
레벨1 릴미 (대학원생)
안녕하세요,
논문을 읽다 질문이 생겨 문의 드립니다.
WB 시 protein 양을 모든 well에 같은 양 걸어주어야 특정 protein의 발현 변화 정도를 비교할 수 있잖아요,
만약 제가 여러 protein을 확인할 때에도 반드시 매번 같은 양을 걸어야 할까요?
제 말은, blot 내에서 아시다시피 b-actin은 10ug만 걸어도 잘 나오지만 어떤 protein은, 특히 phospho form은 10ug로는 잘 안 나오는 경우가 있습니다.
이럴 때 b-actin은 그대로 두고 phospho form의 양을 조금 늘려서 loading하는 것이 가능할까요?
그리고 어떤 논문의 경우 20ug 걸었다, 어떤 논문은 18~22ug의 양을 걸었다라고 쓰기도 하던데 뭔가 통상적인 protein loading 양의 허용범위? 같은 것이 있는지도 궁금합니다.
감사합니다.
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