실험 Q&A Chemical biology > Analysis
protein pulification 과정에 대한 질문
레벨1 acoli (대학생)
제가 lab에서 e.coli를 통해 얻은 protein을 정제하는 과정에서 LC를 사용하고 있는데 Eluent를 유기 용매 위주로(물에 잘 녹지 않습니다) 사용하고 있습니다.
이후 유기용매를 날려주기 위해 Lyophilization 과정을 하는데 종종 과정 중에 녹거나, 하루가 지나고 나면 아무것도 남지 않는 것이 고민입니다.
처음엔 protein 수급이 안되었는지 생각했는데, SDS-PAGE를 하거나 microtube 정도의 scale에서 진행을 하면 protein이 확인 되지만, conical tube에 10~15ml 정도의 scale 에서는 여전히 진행이 되지 않아 너무 고민입니다.
혹시 비슷한 일을 겪었거나 해결해본적 있으신 분 계시면 조언 부탁드립니다
참고로 HPLC 사용 시 gradient elution을 사용하고, Elution은 물, TFE, Acetonitle, IPA 등을 사용하며 protein inject 용으로 사용하는 용매는 MC와 HFIP를 섞어 사용합니다
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