cloning하는중에 clone size확인하려고 agarose gel에 샘플 loading후
voltage는 어느정도로 하는지요?
빨리 달리기 위해 200V는 너무 빠른가요?
사이즈에 따라 적정 전압이 있는지 궁급합니다
감사합니다.
150으로 쓰고는 있습니다만
200이 된다고 드라마틱하게 빠르게 끝나진 않을겁니다.
150도 열이 많이 나니 200 올려놓고 기기 앞에서 문제는 없는지 보면서 해보세요
젤탱크의 두 전극 사이의 거리에 따라서 전압을 조정하면 됩니다.
두 전극 사이의 거리가 20cm 짜리와 40cm 짜리에 같은 200V 를 걸면 실제 가해지는 전압은 각각 1V/cm와 0.5V/cm 가 됩니다.
경험상 0.5V/cm 정도가 적당한 것 같아요. 급하면 buffer 의 온도가 올라가지 않는 조건이라면 1V/cm 이상 올려도 되지요.
강시님 감사합니다.
두 전극 거리가 25cm 정도 200V 를 걸면 빨리 젤이 내려가는데
15분 정도면 사이즈는 확인이 되네요.
근데 30분정도 달리면 버퍼 온도가 좀 올라가긴하는데 혹시 dna에 변성이라도 생기게
될까요? 타겟 젤을 elution해야 할 경우 버퍼온도 상승에 따른 부작용이 있을까요?
buffer가 뜨끈뜨끈할 정도면 DNA에도 기기에도 좋을리 없고
증발도 많이 되서 buffer 농도도 농축되어 진해지고
그럼 더 빨리 뜨끈뜨끈해 질겁니다.
buffer 온도가 올라가면 buffer를 바꿔서 사용하세요.
새로만든 걸로.