실험 Q&A Immunology > Immunophenotyping
bone marrow derived dendritic cells 배양 및 활성화 실험 관련 (Detachment, 배양 조건)
레벨1 콩뚱콩뚱 (대학원생)
안녕하세요.
현재 쥐 골수에서 세포를 분리하여 100mm petri dish 에서 GM-CSF 추가해서 6일간 배양한 후 동동 떠있는 세포 혹은 PBS pipetting 시 떨어지는 세포 (losely adherent cells) 만 모아서 사용하고 있습니다.
그러고 나서 24 well (tissue culture)에 배양 하였는데 dendritic cells 들이 떠있는 세포들도 있지만 바닥에 딱 달라붙어서 20mM EDTA+PBS 에 30분 incubation 후에 pipetting 해도 떨어지지 않더라구요... 이후에 이 세포들을 대상으로 FACS 분석 예정이여서 최대한 surface marker 를 손상시키고 싶지 않은데... Cell scraper, TryPLE, Cell dissociation buffer 중에 어느 방법이 surface marker 손상을 최소화하되 잘 떨어질까요???
그리고 Petri dish에서 배양하라고 나와있는데 혹시 culture dish에 배양해도 관계가 없을까요???
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