안녕하세요 

sample을 만들고 단백질 정량을 충분히 하여 70v로 loading하고 

transfer를 2시간을 하였고 pbst로 washing하고 5% skim milk로 1시간 blocking하고

washing 하고 확인하였는데 actin이 잘 나오지가 않습니다.

문제는 정량문제인듯한데....

어디서부터 다시해야할지 모르겠습니다.

BCA로 다시 STD curve그리고 처음부터 sample prep을 해야할까요?

아니면 loading 이나 다른 부분에서 문제가 있는걸까요?

washing은 10분간격으로 3회 

모든 시약은 당일 제조 

1차 Ab 1:3000

2차 Ab 1:5000